Исследование состава микробных маркеров по Осипову Г.А.

Анализ микробиоты по Осипову — это метод оценки состава и состояния микрофлоры организма, основанный на применении газовой хроматографии-масс-спектрометрии (ГХ-МС). В отличие от традиционных методов, направленных на выявление самих микроорганизмов, данный подход фокусируется на определении специфических микробных метаболитов — жирных кислот, альдегидов, спиртов и стеринов, которые являются продуктами жизнедеятельности бактерий, грибов и вирусов.

Каждый вид микроорганизмов синтезирует уникальный набор этих соединений, что позволяет с высокой точностью идентифицировать и количественно оценить разнообразие микрофлоры в различных биологических материалах, таких как кровь, кал, моча и другие.

Метод разработан российским микробиологом Георгием Андреевичем Осиповым и применяется более 20 лет для диагностики инфекций, дисбиозов и воспалительных процессов.  

Преимущества метода по сравнению с другими

Метод газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МС) по Осипову обладает рядом значительных преимуществ перед традиционными подходами к исследованию микробиоты. Одним из ключевых достоинств является высокая точность и воспроизводимость результатов, достигаемая благодаря способности метода идентифицировать и количественно оценивать более 50 видов микроорганизмов, включая бактерии, грибы и вирусы, в рамках одного исследования.  

В отличие от классических бактериологических методов, требующих культивирования микроорганизмов, ГХ-МС не нуждается в наличии живых бактерий. Это позволяет выявлять даже те микробы, которые трудно или невозможно вырастить в лабораторных условиях, включая "спящие" возбудители, неактивные на момент исследования.

Еще одним важным преимуществом является анализ конечных продуктов метаболизма микроорганизмов, таких как жирные кислоты, альдегиды и спирты. Это обеспечивает прямую оценку активности микрофлоры и позволяет выявлять дисбаланс, связанный с различными заболеваниями.  

Метод ГХ-МС также характеризуется высокой чувствительностью и скоростью проведения анализа. Полный цикл исследования занимает около 2,5 часов, что значительно ускоряет процесс диагностики по сравнению с традиционными методами.

Зачем проводят исследование микробиоты?

Анализ микробиоты назначается для оценки состояния микрофлоры организма, выявления дисбаланса и диагностики патогенных микроорганизмов. Результаты исследования позволяют определить нарушения баланса микрофлоры, диагностировать присутствие патогенных микроорганизмов и выявить метаболические отклонения, связанные с деятельностью микробов.

Показания для проведения:

• Гастроэнтерологические расстройства: синдром раздражённого кишечника, частые запоры или диарея, болезнь Крона, язвенный колит.  
• Нарушения после антибиотикотерапии: изменения в микрофлоре, возникшие на фоне приёма антибиотиков.  
• Инфекции урогенитального тракта: хронические воспалительные заболевания, бесплодие, нарушение микрофлоры половой системы.  
• Кожные заболевания: угревая болезнь, атопический дерматит, псориаз.  
• Аллергические реакции: непереносимость определённых продуктов питания.  
• Состояния после перенесённых инфекций: например, нарушение стула после COVID-19.

Какой биологический материал подходит?

Для проведения исследования микробиоты по методу Осипова чаще всего используется венозная кровь, из которой исследуется сыворотка или плазма. Однако методика обладает универсальностью и может применяться к различным видам биологического материала.  

Возможные биотопы для анализа включают:

• Тонкий кишечник: анализ проводится по венозной крови, отражая состояние микрофлоры данного отдела желудочно-кишечного тракта.  
• Толстый кишечник: исследуется посредством анализа кала, что позволяет оценить состав микробиоты в этом отделе кишечника.
• Системная кровь: помимо оценки микрофлоры кишечника, анализ крови может предоставить информацию о системных инфекциях и общем состоянии микробиоты организма.

Какие маркеры определяются?

При использовании газовой хроматографии-масс-спектрометрии (ГХ-МС) выявляются специфические микробные метаболиты, отражающие активность различных микроорганизмов. К ключевым индикаторным веществам относятся:

• Индол и скатол: продукты распада аминокислоты триптофана, вырабатываемые определёнными бактериями.
• Фенол и крезол: метаболиты тирозина, образующиеся под воздействием микрофлоры кишечника.
• Короткоцепочечные жирные кислоты (КЦЖК): уксусная, пропионовая и масляная кислоты, являющиеся результатом ферментации углеводов анаэробными бактериями.
• Высшие жирные кислоты: компоненты клеточных мембран микроорганизмов, уникальные для каждого вида, что позволяет идентифицировать присутствующие бактерии.
• Альдегиды и спирты: промежуточные или конечные продукты метаболических процессов, характерные для определённых групп микроорганизмов.
• Стеролы: липидные соединения, присутствующие в мембранах некоторых бактерий и грибов, служащие дополнительными маркерами для их идентификации.

Определение концентрации и соотношения этих метаболитов позволяет оценить состав и функциональное состояние микробиоты, выявить дисбаланс и определить наличие патогенных микроорганизмов. Метод ГХ-МС обеспечивает высокую чувствительность и точность в анализе микробных сообществ, что делает его ценным инструментом в диагностике и мониторинге различных заболеваний.

Как подготовиться к анализу?

Чтобы результаты исследования были точными, важно заранее выполнить несколько обязательных условий.

1. За 8–12 часов до сдачи биоматериала необходимо полностью отказаться от еды — анализ проводится строго натощак.

2. За день-два до процедуры следует исключить из рациона жирные блюда, копчёности, острые специи и алкоголь. Эти продукты могут повлиять на метаболические показатели и исказить профиль выявляемых соединений.

3. Пробиотики, антибиотики и противомикробные средства следует отменить минимум за 10 суток до обследования. Также не рекомендуется выполнять анализ в период острых заболеваний или вскоре после курса лечения.

4. За сутки желательно избегать физических перегрузок, перегрева и сильного эмоционального напряжения. Соблюдение этих простых правил повышает достоверность результатов и облегчает их дальнейшую интерпретацию.